紫外分光光度計(jì)根本作業(yè)原理和紅外光譜儀類似，使用必定頻率的紫外可見光照耀被剖析的有機(jī)物質(zhì)，導(dǎo)致分子中價(jià)電子的躍遷，它將有挑選地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而改變的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，關(guān)于一個(gè)特定的波長(zhǎng)，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因而測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性剖析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的對(duì)比，還能進(jìn)行定量剖析。

紫外-可見分光光度計(jì)

紫外-可見分光光度計(jì)的類型很多，但可概括為三種類型，即單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。

1、單光束分光光度計(jì)

經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪番經(jīng)過參比溶液和樣品溶液，以進(jìn)行吸光度的測(cè)定。這種簡(jiǎn)便型分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)略，操作方便，維修容易，適用于慣例剖析。

2、雙光束分光光度計(jì)

經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強(qiáng)度持平的兩束光，一束經(jīng)過參比池，一束經(jīng)過樣品池。光度計(jì)能主動(dòng)對(duì)比兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它變換成吸光度并作為波長(zhǎng)的函數(shù)記載下來。

雙光束分光光度計(jì)通常都能主動(dòng)記載吸收光譜曲線。由于兩束光一起別離經(jīng)過參比池和樣品池，還能主動(dòng)消除光源強(qiáng)度改變所導(dǎo)致的差錯(cuò)。

3、雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)

由同一光源宣布的光被分紅兩束，別離經(jīng)過兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長(zhǎng)1和2 的單色光;使用切光器使兩束光以必定的頻率替換照耀同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個(gè)波利益的吸光度差值。關(guān)于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)剖析，以及存在布景攪擾或共存組分吸收攪擾的情況下，使用雙波長(zhǎng)分光光度法，通常能進(jìn)步辦法的靈敏度和挑選性。使用雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)，能取得導(dǎo)數(shù)光譜。

經(jīng)過光學(xué)系統(tǒng)變換，使雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長(zhǎng)作業(yè)方式。假如能在1和2處別離記載吸光度隨時(shí)刻改變的曲線，還能進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研討